摘要
细胞外囊泡（EVs）中的外泌体（EXOs）在细胞通讯中具有关键作用，参与多种生理与病理过程。这些由内体系统产生、直径30-150 nm的脂质囊泡具有独特的杯状形态，广泛存在于血液、脑脊液、尿液等生物体液中。外泌体可通过局部或远程传递蛋白质、脂质、microRNA等生物活性物质，调控受体细胞功能及微环境。本文系统综述了外泌体的生物发生、分离纯化及临床应用，重点阐述其作为治疗载体在递送小分子药物、基因及纳米颗粒中的应用价值，特别是在癌症治疗与免疫疗法中的突破。同时，文章详细探讨了外泌体在皮肤、骨软骨、心脏及神经系统修复中的作用机制，通过解析其促进血管生成、细胞增殖及细胞外基质重构等过程，为再生医学提供新思路。
引言
间充质干细胞（MSCs）因其强大的再生能力和免疫调节特性备受关注，其分泌的外泌体通过旁分泌作用促进血管生成、抑制凋亡与炎症反应。1983年发现于羊网织红细胞的外泌体，2007年被证实可传递mRNA和microRNA实现细胞间遗传物质交换。这类囊泡几乎由所有细胞类型（脂肪细胞、T细胞、树突状细胞等）分泌，通过运输生物分子在免疫调节、组织修复中发挥关键作用。研究显示，MSC来源的外泌体已在慢性伤口、心肌梗死、脑动脉闭塞等疾病的体外和动物模型中展现出治疗潜力。
外泌体生物发生
外泌体起源于初级内体的内陷形成，随内体向细胞核迁移逐渐成熟为晚期内体，期间生成腔内囊泡（ILVs）。此过程涉及多囊泡体（MVBs）的形成及与溶酶体的融合调控。不同微环境条件可影响外泌体的分泌量及其分子组成，为临床干预提供理论依据。
外泌体制备来源
血液系统来源的外泌体包括血小板、淋巴细胞及红细胞分泌的囊泡。值得注意的是，红细胞来源外泌体因载有特定膜蛋白和脂质成分，在生物标志物研究中具有独特价值。此外，尿液、乳汁等体液中的外泌体因其非侵入性获取优势，在疾病诊断中展现出应用前景。
分离与表征技术
超速离心、尺寸排阻色谱及免疫磁珠法是主流分离技术，各具优劣。原子力显微镜（AFM）、透射电镜（TEM）等用于形态观察，纳米粒子追踪分析（NTA）可定量外泌体浓度。标准化分离流程的建立对保证实验可重复性至关重要。
药物递送功能
外泌体的天然生物相容性使其成为理想药物载体。载有姜黄素的外泌体通过鼻腔给药可有效缓解脑部炎症，其稳定性较游离药物显著提高。基因沉默microRNA的靶向递送为肿瘤治疗提供了新策略。
皮肤再生应用
皮肤伤口愈合涉及细胞迁移、血管生成等复杂过程。外泌体通过调控TGF-β/Smad信号通路促进成纤维细胞活化，加速细胞外基质沉积。动物实验显示，负载VEGF的外泌体可使创面愈合速度提升40%。
临床转化挑战
尽管外泌体在再生医学中前景广阔，但规模化生产、质量控制及体内靶向效率仍是主要障碍。当前研究需深入解析外泌体生物合成的分子调控机制，建立符合GMP标准的生产体系。
未来展望
外泌体作为生物模拟纳米载体，正推动精准医疗的发展。通过工程化改造其表面分子，可实现特定组织靶向递送。例如，修饰神经靶向肽的外泌体在阿尔茨海默病治疗中表现出显著神经保护效应。随着多组学技术的整合应用，外泌体有望成为新一代诊断标志物和治疗工具。
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