临床标本（组织、体液）培养分离出粗球孢子菌（Coccidioides immitis 或 C. posadasii）。
分子检测阳性：
PCR检测检出粗球孢子菌特异性基因（如Ag2/PRA抗原基因）。
支持条件（临床与实验室依据）：
典型临床表现：
发热（≥38℃）伴以下任一症状：
骨骼疼痛（脊柱/肋骨/长骨）
皮肤结节/溃疡（躯干或四肢近端）
头痛伴脑膜刺激征（颈项强直）
体重减轻>5%或持续乏力（>4周）。
血清学证据：
补体固定试验（CF）抗体滴度≥1:16。
抗粗球孢子菌IgG抗体持续升高（恢复期较急性期升高4倍）。
影像学证据：
X线/CT显示溶骨性病变（骨骼）或环形强化脓肿（软组织）。
MRI显示脑膜线状强化（中枢神经系统受累）。
阈值标准：
确诊：满足"必须条件"中任意一项。
高度疑似（无病原学证据时）：
典型临床表现 + 血清学阳性（CF≥1:16或IgG 4倍升高） + 影像学特征性表现。
二、辅助检查
检查项目树：
mermaid
graph TD
A[辅助检查] --> B[实验室检查]
A --> C[影像学检查]
A --> D[病理学检查]
B --> B1[血清学：CF试验/抗球孢子菌IgG]
B --> B2[分子检测：PCR]
B --> B3[培养：组织/体液]
C --> C1[X线：骨骼溶骨性病变]
C --> C2[CT：软组织脓肿]
C --> C3[MRI：脑膜强化]
D --> D1[组织活检：球体+肉芽肿]
判断逻辑：
血清学（CF/IgG）：
滴度≥1:16提示活动性播散感染，需结合临床表现；阴性结果不排除诊断（免疫抑制者可能假阴性）。
影像学：
骨骼溶骨性病变+软组织肿胀→优先活检；脑膜强化→需腰椎穿刺查脑脊液。
组织活检：
发现球体可确诊；肉芽肿性炎症为支持性证据（需排除结核等）。
PCR与培养：
PCR快速但敏感性低；培养为金标准但耗时长（2-5周），两者互补。
三、实验室检查的异常意义
血清学检查：
补体固定试验（CF）滴度≥1:16：
意义：提示播散性感染，滴度越高提示感染负荷越大。
处理：启动抗真菌治疗，监测滴度变化（治疗有效时下降）。
抗球孢子菌IgG阳性：
意义：既往或现症感染标志，4倍升高提示活动性感染。
处理：结合临床表现决定治疗。
组织病理学：
球体检出：
意义：确诊依据，明确感染阶段（成熟球体含内生孢子提示活动期）。
处理：立即开始靶向治疗。
肉芽肿性炎症：
意义：支持诊断但非特异（需结合其他检查）。
炎症标志物：
CRP>50 mg/L或ESR>50 mm/h：
意义：反映疾病活动度，治疗有效时下降。
处理：监测治疗反应。
脑脊液检查（CNS受累时）：
白细胞>5/μL+蛋白>45 mg/dL：
意义：提示脑膜炎，需加做脑脊液CF试验（敏感性60-80%）。
四、总结
确诊核心：依赖组织活检/培养检出球体或PCR阳性。
关键支持：血清学（CF≥1:16）结合影像学（溶骨/脓肿/脑膜强化）。
鉴别重点：
骨骼病变需与骨结核、骨肿瘤区分；
皮肤病变需与孢子丝菌病、皮肤结核鉴别。
参考文献：
IDSA《球孢子菌病诊疗指南》（2020）、BMJ Best Practice、Uptodate临床知识库。