一项新研究的作者表示，HEK293细胞可能是病毒载体生产中最常用的宿主，但它们远非理想选择。该作者认为，基因治疗公司需要更有效的替代方案来支持商业增长。
由都柏林大学学院和APC服务公司团队进行的这项研究，调查了用于制造重组腺相关病毒(rAAVs)的生产系统，而许多基因疗法都依赖于这种病毒。
研究的关键发现是，迄今为止使用的八种商业细胞系——包括使用最广泛的HEK293细胞系——没有一种是理想的。
APC公司的首席作者詹姆斯·康希迪(James Conheady)告诉《GEN》杂志："使用现有细胞系的当前rAAV生产方法难以满足临床需求，这导致基于rAAV的基因疗法价格昂贵。"
"新型细胞系可能能够以更高的产量和/或更优的质量生产rAAVs，这最终可能帮助使这些疗法对需要它们的人们更加可及。"
不足之处
到目前为止，已有八种不同的宿主细胞系统被用于生产rAAVs，每种系统都有其优缺点。
例如，一些细胞系产生的rAAV衣壳不含有所需的遗传物质。这些空载体是一个问题，因为它们会引起免疫反应而不提供治疗效果。
其他细胞系则难以制造足够的衣壳。例如，系统性给药的基因疗法推荐剂量超过患者体重的1×10¹⁴ vg/kg。而HEK293细胞每次生产运行的产量仅为约10¹⁰。
成本是另一个问题。
据康希迪及其合著者称，用于修饰细胞系的GMP级质粒和转染试剂（使它们产生的载体包含目标基因）占最终疗法价格的相当大比例。
替代系统
考虑到这些不足之处，寻找更有效替代宿主的搜索工作已经展开并不令人意外。
康希迪表示："归根结底，rAAV制造商都希望从上游工艺中获得相同的东西——高滴度、改进的满/空比和转导率。"
康希迪补充说，目前的细胞系开发工作集中在结合理想特性上，其中抗凋亡性、减弱的抗病毒免疫反应以及分泌特性是最受追捧的特征。
"本综述中确定的许多特征与已在HEK293细胞rAAV生产环境中证明有益的修饰相一致。例如，将载体颗粒从细胞分泌到生产培养基中可以大大简化下游操作，并可以通过敲除参与内体转运的基因来影响这一过程。"
"理想的细胞系还应该对转染和病毒诱导的凋亡具有抵抗力，以产生大量的载体。敲除促凋亡基因BAX和BAK1已被证明可以提高载体产量，"他表示。
康希迪表示，行业是否会看到这些努力得到回报并就"理想"细胞系达成一致还有待观察。
"制造商将需要充分的理由来同意标准化方法，新型细胞系可能需要在产量和质量特性方面大幅优于所有其他细胞系——正如俗话所说，'你坚持使用已有的东西，直到有更好的选择'。"
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