关键要点
- 单克隆抗体（mAbs）特别是免疫球蛋白（IgG）疗法已广泛应用于多种疾病治疗
- 辉瑞研究团队开发出基于pH梯度的阳离子交换分离技术
- 该方法适用于传统盐梯度阳离子交换难以纯化的IgG2抗体
辉瑞公司的研究人员开发了新型pH梯度阳离子交换分离技术，用于纯化免疫球蛋白G2（IgG2）二硫键异构体。相关研究成果已发表于《色谱学A杂志》（Journal of Chromatography A）。
单克隆抗体自1986年首次获批以来，已有96种IgG类抗体获得美国FDA批准。IgG2亚类抗体具有独特的铰链区二硫键异质性，这导致不同异构体对分子功能产生特异性影响。在研的IgG2疗法中，异构体分布受制备工艺影响，其含量变化会影响药物活性。
研究人员采用pH梯度阳离子交换法对IgG2二硫键异构体进行纯化。实验中使用的IgG2单抗无法通过传统盐梯度阳离子交换法纯化，通过高分辨率变性反相色谱分析和荧光检测技术，最终获得20.3%至80.8%不同浓度的IgG2-B异构体溶液。各批次样品在杂质水平保持一致的前提下，均适用于活性检测。
研究显示，IgG2-A异构体通过增强Fab区域灵活性提高活性，而IgG2-B异构体则通过FcγR非依赖性激动剂活性发挥作用。新型纯化工艺可有效保留IgG2-B异构体池的酸碱种类、聚集体和片段含量的一致性，唯一差异在于IgG2-B含量。
虽然该方法目前仅应用于特定生物治疗药物，但为传统方法难以处理的IgG2抗体提供了可行替代方案。未来研究将探索该技术对其他抗体的适用性，结合高通量质谱技术分析晚期洗脱的异构体亚群，为抗体药物开发提供重要表征工具。
参考文献
(1) Chipley, M.; Wells, K.; DuMontelle, J. L.; Smith, J.; Powers, T. W.; Lerch, T. F. pH-Gradient Cation Exchange Purification of IgG2 Disulfide Isoforms. J. Chromatogr. B 2025, 1264, 124716.
(3) Strohl, W. R. Structure and Function of Therapeutic Antibodies Approved by the US FDA in 2023. Antib. Ther. 2024, 7 (2), 132-156.
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